The FDA published Good Guidance Practices in Febuary 1997.
The guidance was developed and issued prior to that date.

Center For Drug Evaluation and Research

Guidance for Industry

Additional copies are available from:
Office of Training and Communicatios
Division of Communications Management
Drug information Brance, HFD-210

5600 Fishers Lane
Rockville, MD 20857

Ⅰ. PURPOSE (목적)

이 지침서는 의약제품에 관한 Current Good Manufacturing Practice(CGMP) 규정을 에 맞게 승인 할 수 있는 방법으로 구성된 무균 공정에 의한 멸균 의약품에 대하여 관심 있는 사람들에게 특정한 실행 및 절차를 알려준다. (연방정부의 법규들 Title 21 code, Parts 210 and 211). 21 CFR Parts 210 and 211에서 규제된 미생물 제품에 관해서는, 만약 Part 600 ~ 680과 Part210, 211을 준수하는 것이 불가능 한곳에서는 Section 210.2(a)와 Part 210와 211d을 참고해야 하고, 의약품 문제에 특별히 적용할 수 있는 법규들은 적용될 수 있다.

Ⅱ. INTRODUCTION (도입)
이 지침서는 21 CFR 10.90하에서 발행되었고, 그런 것과 같이 이 지침서는 법적 요구 사항들은 아니지만, FDA에 승인될 수 있는 일반적인 적용할 수 있는 법칙과, 실행들을 다룬다. 일반인들은 FDA로부터 승인 받을 수 있는 보증을 갖는 이 지침서를 따를 수도 있고, 다른 절차들을 따를 수도 있다. 다른 절차들이 선택되어졌을 때 나중에 승인될 수 없는 것으로 결정된 행동에 대한 자본과 노력의 소비를 방지하기 위하여 요구되지는 않지만, FDA와 함께 문제를 논의해도 좋다.

이 지침서는 대행 회사가 규제하는 노력을 통한 요구와 관계된 사람들이 제출한 논평을 통한 요구를 인식하기 때문에, 때때로 수정될 수도 있다.

무균공정에 의한 멸균 의약품과 최종 멸균에 의한 멸균 의약품 사이에는 차이점이 있다. 최종멸균은 일반적으로 높은 품질의 환경 하에서 생산제품 용기를 채우거나 밀폐하는 것을 포함한다. 제품, 용기, 그리고 밀폐는 일반적으로 매우 높은 미생물학적인 품질을 가지고 있으나, 멸균한 것이 아니다. 채우거나 밀폐하는 곳의 환경은 매우 높은 품질로 수행되는 것은 생산품의 미생물의 함량의 최소화 시키는 것과, 연속적인 멸균공정이 성공적이라는 것을 보증하는 것을 돕기 위해서 이다. 최종 용기의 제품들은 일반적으로 열이나 방사선을 멸균공정에 보내어 진다. 무균공정에서, 의약품, 용기, 그리고 밀폐한 것은 멸균공정에 각각 보내어 지고, 그리고 나서 함께 모아진다. 제품이 최종 용기에 있은 후에는 제품을 멸균하는 추가적인 공정이 없기 때문에, 매우 높은 품질의 환경 하에서 용기들이 채워지고, 밀폐된 제품의 무균을 유지하는 것은 매우 중요하다. 게다가, 수행될 수 있는 변화는 무균공정에 대한 것 보다 최종 공정, 최종 제품이 무균상태라는 것을 보증의 높은 수준을 달성하기가 더 어렵다. 예를 들어, 무균의 집합이전에, 최종 생산품의 다른 형태는 다른 멸균 공정들에 보내어 진다. 그러한 것들로는 유리 용기에 대한 건조 열, 고무 밀폐물에 대한 압력 하에서의 증기, 액체 조제 형태에 대한 여과, validation과 관리를 통하는 요구, 각각 실수의 가능성이다. (Sterilized drug product게 관해서는, 다른 한편으로는, sterilization process가 있고, 실수에 대한 제한성이 있다.) 게다가, sterilized dosage의 어떤 조작들, 용기들, 그리고 aseptic assembly 하기 전에 closures은 오염의 위험을 포함하고 있고, 그러므로 조심스럽게 관리 되어야 한다.

의약품에 관한 CGMP 규정들의 어떤 부분들을 준수하는 승인될 수 있는 FDA가 신용하는 aseptic process에 관해 여러 의문들이 제기 되어 왔다. 자주 질문 된 부분들은 건물들, 시설들, 성분들, 용기들/closures, 생산 시간 제한성들, validation, 실험실 관리, 그리고 무균 시험이다. 왜냐하면 문제의 대부분은 특별히 process validation에 관심을 가져 왔고, 이 지침서는 이 영역을 폭 넓게 언급을 한다. 이 지침서는 이러한 질문에 대응하는 것과 sterile drug product의 무균 공정의 어떤 기술적 측면을 명확하게 하기 위해서 이다. 이 지침서는 종업원 위생, aseptic gowning, 그리고 청정실 설계와 같은 무균 공정의 여러 중요한 측면들을 언급하지 않은 것을 주목해야 한다. 이러한 것과 다른 측면들은 미래에 필요에 의해서 다루어 질것이다. 비록 몇몇 부분들은 멸균 의약 제품의 제조에 적용에 할 수 있을 지라도, 이 지침서는 정기적으로 멸균 의약 제품을 언급하지는 않는다.

이 지침서에서, 21 CFR part 211의 어떤 부분들의 언급된 CGMP 요구 사항들은 FDA가 교류의 요구 사항의 수단으로 승인하는 실행들과 절차들에 의해 따라 가야 한다. 정기적으로 제조되는 무균 의약 제품에 정기적으로 처리된 제법에 적용할 수 있는 규정들의 부분은 확인되어야 한다. 단지 질문에 관계된 이러한 부분들이 제기되어 왔다. 이 지침서는 또한 독자들에게 유용할수 있는 참고 문헌을 포함한다.

Definitions
Critical area – 멸균된 제품 또는 용기/ closures은 주위에 노출된 지역.

Critical surface - 멸균된 제품 또는 용기/ closures에 접촉하게 되는 표면들.

D value – 주어진 온도에서 미생물을 90% 까지 줄이는데 필요한 시간.

Overkill sterilization process – 1분의 D value을 가지고 있는 미생물의 적어도 12 log 감소를 공급하기에 충분한 공정.

Sterilizing filter – 필터 표면 cm²당 10⁷ 유기물의 농도일 경우, micro-organism

Pseudomonas diminua에 따라 변하는 필터는 무균 유해 방출물을

만들어 낸다.

Validation – 특수한 공정이 미리 정해진 사양들이나 품질 특성들을 만족하는 제품

을 연속적으로 생산한다는 것을 보증하는 높은 수준의 등급을 제공하는 확립되고 문서화된 증거.

Worst case – 표준 조작 절차들에서 최고, 최저의 공정 한계와 상황을 포함하고, 초

래하는 조건들의 조합. 이상적인 조건과 비교 해보았을 경우 가장 큰 공정이나 제품의 실패를 기회를 부여 할 수 있다.

Ⅲ. BUILDING AND FACILLITIES (건물과 설비)

Requirements
Section 211.42(설계 및 건설 특징)은 일부분 오염을 막기 위해서는 조작이 분리되거나 명확화 된 지역이 있어야 한다. 게다가 무균 공정에서는 양성의 압력하의 높은 효율을 미립자의 공기 여과기를 통한 적절한 여과되는 공기 공급기가 있어야 하고, environment를 관찰하고 그리고 무균 조건들을 관리하는데 사용한 장비를 유지하기 하는 시스템이 있어야 한다.

Section 211.46(통풍, 공기 여과, 공기 난방 그리고 냉방)은 부분적으로 공기압에 관한 적절한 조절, 미생물, 먼지, 습도를 위한 장비, 그리고 적절하게 공급된 온도, 그리고 생산지역에 적절하게 사용된 prefilters와 미립자 공기 여과기들을 포함하는 공기여과 시스템이 있어야 한다.

Guidance
무균 공정에서, 분리와 관리를 요구하는 조작의 다양한 지역, 조작의 성질에 좌우되는 공기 품질의 다른 정도에 의존하는 각각 다른 지역이 있어야 한다. 두개의 노출 지역은 drug product 품질에 특별히 중요하며, 그 지역은 중요한 지역들과 관리되는 지역이다.

CRITICAL AREAS
Critical area는 멸균된 제조 형태, 용기들, 그리고 closures가 주위에 노출된 지역을 말한다. 이런 지역에서의 행동들은 멸균 원료들/제품의 조작하기 이전 그리고, 용기/뚜껑의 조작들을 포함한다. 이러한 조작들은 aseptic core 또는 aseptic processing이라 불리는 지역에서 행하여 진다.

제품은 더 이상 중간체 용기에서 처리되지 않고, 오염에 취약하기 때문에 이 지역은 중요하다. 그러므로, 품질, 그리고 특별히 제품의 멸균을 유지하기 위해서는 실제적인 조작의 중간적인 접근에 있어서의 환경은 높은 품질이어야 한다.

환경적인 품질의 한 측면은 공기중의 부유물의 함량이다. 부유물은 제품에 들어가 물리적으로 제품을 오염 시킬 수 있고, 또는 미생물, 생물학적 수단 작용으로 작용하기 때문에 부유물은 중요하다. 그러므로, 공기중의 입자 함량을 최소화 하는 것도 중요 하고, 입자들이 나타나는 곳에서는 효과적으로 제거하는 것도 중요하다. 멸균된 용기들/closures, 그리고 채움/밀폐 조작들의 공기들은 수용할 수 있는 미립자 품질을 가지고 있어야 한다. 측정 기준은 채움/밀폐의 조작을 하는 동안, 공기의 상류흐름, 작업장에서 한 발자국 이상 멀어지지 않은 곳에서 측정하였을 때 크기가 0.5마이크론 보다 작거나 큰 입자의 개수가 100개(100 class) 이상이 아니어야 한다. 파우더를 채우는 작업은 매우 높은 수준의 분말 입자가 그들의 성질에 의해 생성하는 것과 파우더를 채우는 작업은 제품 오염의 위험을 제기하지 말아야 한다는 것을 인식하여야 한다. 이러한 경우들, 1피트의 거리의 범위 내에서 공기 품질을 측정한다는 것은 실행 가능하지 않을 수 있고, 제품 품질에 문제를 일으킬 수 있는 공기오염으로 부터의 분말 입자의 수준은 “background noise level”과 여전히 구분된다. 이러한 예들에서, 이와 같은 방법으로 공기를 샘플로 채취하는 것, 가능한 범위에서는 제품이 노출된 외부의 미립자 오염의 옳은 수준을 특징화 하는데 있다.

Critical area에서의 공기는 filing/closing area에서 떨어져서 미립자를 청소하기 위해서는 충분한 속도를 가지고 여과된 laminar flow air의 HEPA 여과기로서 사용되려는 순간에 공급되어야 한다. 정상적으로, operations이 미립자를 많이 생성시키는 곳이나, 장비의 형상이 laminar flow를 방해하는 곳에서는 더 빠른 속도가 필요하지만, 20%의 더 빠르거나 늦은 90 ft/min의 속도이면 적절하다.
공기는 또한 높은 미생물 품질을 갖추어야 한다. 단지 10 ft³당 one colony forming unit는 달성할 수 있고 바람직한 것으로 간주되어야 한다(Ref.3)

공기는 filling/closing 조작들에 있어서 높은 미립자 또는 미생물적인 품질을 유지하는 유일한 가스이다. 질소, 이산화탄소 같은 제품, 용기/closure, 또는 제품 접촉 표면에 접촉하고 있는 다른 가스들은 멸균 여과 되어야 한다. 게다가 압축된 공기는 명확한 오일 증기가 없어야 한다.

중요한 지역에서는 인접한 청정지역에 못 미치는 것에 관해서는 구별되는, 관계 있는 positive 압력을 가지고 있어야 한다. 물의 0.05인치 압력 차이는 승인 될 수 있다.

CONTROLLED AREAS
환경을 관리하는 중요한 지역의 다른 형태인 관리된 지역은 멸균되지 않은 제품, 공정중인 원료들, 그리고 용기들/closures가 제조되는 지역을 말한다. 이것은 성분들이 혼합되고, 성분들, 공정중인 원료들, 의약 제품들과 의약 제품들이 장비의 표면에 접촉을 하고 있는 지역들이 plant environment에 노출된 지역을 포함하는 것이다. 이 environment는 높은 미생물적이고 미립자의 품질이어야 하는 것은 최종 제품에 미립자의 오염의 수준을 최소화 하기 위한 것과 물품의 미생물적인 함량과 연속적으로 멸균된 성분들을 관리하기 위해서 이다.

활동하는 동안 노출된 물품들의 접근에서 측정되었을 때, 입자의 크기가 0.5 마이크론이거나 그 이상의 입자가 ft³당 1000, 000보다 낮은 개수를 가지고 있다면 (Class 1000,000)을 가지고 있다면, Controlled area에서의 공기는 일반적으로 승인될 수 미립자 품질이다. 미생물 품질에 관해서는, 10 ft³ 당 25 colony forming보단 낮은 범위는 승인될 수 있다(Ref. 3).

관리되는 지역들에서 공기 품질을 유지하기 위해서는, 충분한 공기의 흐름과 인접한 관리되지 않은 지역에서는 다른, 관계되는 positive 압력을 달성하는 것이 중요하다. 이 점에 있어서는, 시간당 적어도 20 공기 변화를 달성하기 위해서는, 일반적으로 적어도 0.05 인치의 수압 차이는 승인될 수 있다. 문들이 개방되었을 경우, 밖으로 향하는 공기의 흐름은 오염의 진입을 최소화 하기에 충분하다.

인접하고 있는 공기보다 다른 가스들이 관리되는 지역에 사용 될 수 있다. 만약 이러한 가스들이 지역에 배출되면, 이러한 가스들은 대기와 같은 품질을 가지고 있어야 한다. 압축된 공기는 확신한 오일 증기들이 없어야 한다.

게다가 이러한 생산 지역들에서는, 높은 품질의 여과된 공기가 장비의 일부분에 공급될 수도 있다. 장비에 있는 공기들은 멸균된 공기, 낮은 미생물 또는 미립자 함량을 가지고 있는 원료들과 접촉하고 있는 곳에서는 특별히 중요하다. 예를 들면, 박테리아를 보유하고 있는 여과기들은 동결 진공 중단이나 더운 공기 멸균기 통풍에 사용되어 지는 것은 멸균된 제품과 접촉하고 있는 곳으로부터 오는 공기는 멸균된다. 이와 마찬 가지로, 멸균된 액체를 포함하는 압력화되지 않은 공기들은 또한 여과되어야 한다. 높은 미생물 품질인 원료를 유지하는 곳에 사용된 탱크에 있는 공기들은 또한 여과되어야 하고, 그리고 여과기들은 건조되는 것은 연속적인 봉쇄 또는 microbial grow-though으로 응축에 의한 축축함을 막기 위해서 이다( 이것을 성취하는 두 가지 방법들은 여과기와 hydrophobic 여과기들에 열을 공급하는 것이다.) 이러한 장비 공기 여과기들은 정기적으로 완전하게 시험하는 것은 중요하다.

공기 품질 유지를 위한 승인될 수 있는 시스템은 완전을 위해 시험되어 지는 HEPA 여과기를 포함하고 있어야 한다. 구성체들은 처음으로 설치되는 것은 sealing gaskets 주변에 새는 것을 발견하기 위해 수행될 때, 완전 시험은 최초로 frame이나 여과 매체를 통하여 수행되어 진다. 그 이후에, 완전 시험은 일정한 간격으로 수행되어야 한다. Critical area에서는 적어도 일년에 두 번씩 그러한 안전 시험을 수행하면 충분하다. 그러나, 공기품질이 승인할 수 없을 정도로 낮거나, 의약제품에 있어서 비멸균 발견의 조사의 부분일 경우에는 더 자주 시험들이 필요해 진다.

HEPA 여과기들의 안전을 보장 할 수 있는 시험 방법은 diocylphathal-ate(DOP) aerosol challenge을 사용하는 것이다. HEPA 여과기와 같은 경우에는 직경이 0.3 마이크론 보다 큰 미립자를 99.97% 함유할 수 있는 능력을 가지고 있기 때문에, challenge로써 사용 되는 어떤 물질들은 이러한 크기 범위의 충분한 입자의 수를 가지고 있다. 승인할 수 있는 DOP challenge는 여과기의 계획된 공기 흐름 속도에서 1리터의 공기당 80 ~ 100 미생물 농도에서의 여과기의 DOP aerosol stream을 도입 하는 것과 적어도 ft³/min의 샘플링 속도에서 적절한 photometer probe를 가지고 여과기의 하류측면의 scanning하는 것을 포함해야 한다. Probe는 여과기의 표면으로 부터 1, 2 인치 떨어진 곳에서 완전한 여과기의 face와 frame을 scan하여야 한다(Ref. 1). 상류 challenge의 0.01퍼센트를 상당하는 것을 나타내는 단일 probe는 수리된 중요한 새는 곳을 지시 하는것으로 간주되어 진다.

여과기의 상류층에 알려진 크기의 입자를 도입하지 않고 particle counter를 사용하는 것은 새는 것을 발견하는데 비효율적일 수 있다.

독자들은 여과 안전 시험과 효율성 시험사이에는 차이가 있다는 것을 주의 하여야 한다. Integrity testing은 여과매체, filter frame, seal에서 누출을 발견하기 위해 수행된다. Challenge는 1~3 마이크론의 크기 범위의 입자로 구성된 다분산 aerosol 이다. 시험은 적절히 행하여 지고, filter test는 probe로 scan 된다. 측정된 하류층 누출은 상류층 challenge를 몇몇 퍼센트로 받아 들여 진다. 다른 한편으로는 효율 시험은 여과속도를 결정하는데 사용된다. 이 시험은 0.3 마이크론 크기의 입자를 사용하고, 여과 매체에 관계가 있고, 그리고 일반적으로 특별한 장치가 필요하다. 하류층에서 나타내는 것은 완전한 여과기 표면에 걸쳐서의 평균을 나타낸다. 그러므로, 여과기의 누출은 효율성 시험에 의해 발견 되지 않을 수도 있다.

속도에서의 현저한 감소는 오염의 가능성을 높일 수 있고, 속도의 변화들은 laminarity에 영향을 미칠 수 있기 때문에, 확립화된 간격의 프로그램에 의해서 각 각의 HEPA 여과기에 대한 공기 흐름 속도를 관찰하는 것은 중요하다.

공기 흐름의 형태는 공기의 sweeping action를 방해하는 turbulence에 의해 평가 된다.

Ⅳ. COMPONENTS (구성 요소)
Requirements

Section 211.80(일반적인 요구 사항들)은 부분적으로 저장에 관한 서류로 된 절차들의 확립, 처리와 시험, 또는 성분들의 승인 또는 거절을 필요로 한다.

Section 211.84(성분들, 의약 제품 용기, 그리고 closures의 시험 이나 승인 또는 거절)은 부분적으로 사용하기 이전에 미생물적인 시험에 보내지는 그들의 의도된 사용을 고려하여 미생물적인 오염에 신뢰할 수 있는 성분들이 적합하지 않다는 것을 요구한다.

Guidance
무균공정에 의해 제조되는 멸균 의약 제품에 사용되는 성분들의 가장 중요한 측면중의 하나는 미생물적인 품질관리 이다. 무균공정에 의해 생산된 최종 의약 제품은 미생물을 함유한 하나 또는 그 이상의 성분의 사용을 통하여 오염될 수 있다. 그러므로, overkill 멸균 공정은 성분들에 적용이 되지 않으면, 오염의 여지가 있는 미생물적인 성분을 일상적으로 특성화하고, 이 bioburden에 바탕을 둔 적절한 수용/거절 한계성을 확립하는 것은 중요하다. 성분이 non-overkill 멸균 공정에 보내어 질 때, 멸균 보증의 높은 수준을 달성하는데 bioburden에 관한 지식은 특별히 중요하다.

무균공정에서, 각각의 성분은 멸균된 결과 혼합물에 대하여 개별 또는 여러 개의 성분들을 멸균 할 수도 있다. 성분들을 멸균하는 데는 여러 가지 방법들이 있고, 그리고 적절하게 유효화 되었을 때 각 각의 방법은 받아 들일 수 있다. 폭 넓게 사용된 방법들은 주사제에 관한 USP 물과 같은 용매에 있어서 성분을 용해하는 것에 생성된 용액의 여과이다. 그 용액은 멸균된 membrane 또는 cartridge 여과기를 통하여 통과한다. 이 방법은 성분이 열에 의해 불리하게 작용 할 것 같은 경우에 유용하다. 이러한 방법의 변화는 무균 결정화 또는 멸균 분말로서 성분들의 침전을 하는 여과된 용액을 제시하는 것을 포함한다. 그러나 이 방법은 다른 방법들 보다 더 많은 처리와 조작을 포함하므로, 가공하는 동안 오염에 대한 더 높은 잠재성을 가지고 있다.

만약 성분이 열에 의해 불리하게 작용하지 않는다면, 그리고 용액일수 녹을 수 있으면, 성분들은 용액으로 만들어 질 수 있고, separate autoclave나 steam-jacked pressurized preparation vessel의 증기멸균에 보내어 진다.

Dry heat sterilization은 열에 안정하고 녹지 않는 성분들에 관한 적당한 방법이다. 그러나 이 방법은 적절하지 않는 열의 침투 및 분배의 문제들을 일으킬 수도 있다. 예를 들어 이 방법에 의한 분말들의 처리는 적당한 열 침투와 분배 연구를 필요로 하는 것은 분말의 절연 효과 때문이다.

Ethylene oxide 노출은 성분들을 멸균하는 다른 방법의 하나이다. 그러나, 초기적인 방법으로서 그것의 효과들은 문제를 발생시킬 수 있는 것은 분말 결정성 내부에 대한 멸균제의 연속적인 침투 부족 때문이다. Ethylene oxide는 무균처리 하는 동안 잠재적인 미생물의 오염에 관하여 예방조치로써 분말들의 표면 멸균에 대해 유용할 수 있다.
발열 물질이 없는 것으로 의도된 제품들에 관하여, 발열물질에 관하여 받아 들일 수 있는 성분들의 승인 또는 rejection에 관한 서류로 된 절차가 있어야 한다. 발열 성분으로 오염된 것으로 발견된 이러한 성분들은 거절되거나
만약 결과 성분들이 적절한 기준, 사양들 그리고 특징들을 만족 시키면 발열 성질을 제거하기 위해 처리를 해야 한다.

Ⅴ. CONTAINERS/CLOSURES (용기/밀폐)

Requirements
Section 211.94(의약 제품 용기와 closures)은 부분적으로 의약품의 성질에 의해 나타나는 곳에서는 의약 제품 용기와 closures은 청소되어야 하고, 멸균되고 그리고 재발열 되는 것을 요구하고 있다. 기준들과 시험 방법들이 지시된 곳에서는 발열적인 성질을 제거하기 위해 청소, 멸균 그리고 progressing의 방법은 문서화되고 따라야 한다.

Guidance
무균처리에 의해 생산된 멸균한 의약 제품의 경우에는, 채우는 것과 밀폐하는 조작들의 공정에 앞서 용기들과 closures의 제조는 단순한 표면 잔해를 제거하는 범위의 넘어야 한다. 주사제용 제품들, 발열 물질이 없는 경우에는 멸균 되어진 최종 제품의 완전은 중요하다. 멸균하거나 비발열성에 사용된 공정들의 형태는 용기/마개를 포함하는 원료들의 성질에 주로 의존하게 된다. 어떤 적절하게 유효화된 공정은 승인 될 수 있다.

유리 용기들의 경우에는, presterilization preparation은 일반적으로 세척 그리고 헹구는 순환하는 연속과정을 포함하게 된다. 이러한 세척들은 효과적으로 파편들을 제거할 뿐만 아니라, 최종 헹굼 물을 높은 품질이어야 하는 것은 중요하다. 만약 최종 헹굼 물이 주사제에 대한 USP물의 요구 사항들을 만족시키면, 최종 헹굼 물은 승인 될 수 있다. Depyrogenation은 방법의 다양성에 의해 수행 될 수 있다. 수행된 화학 용액들에 의한 것이나, 주사제에 대한 물을 가지는 헹굼을 예로 들 수 있다. 건조열은 유리 용기들을 멸균하거나 depyrogenate 하기 위해 사용된다. Dry heat sterilization /depyro-genation의 validation은 열 침투과 열 분배 과정을 포함하고, 전형적인 공정 주기들과 실제적인 생산 실시들을 하게하는 loading configuration을 포함하고 있어야 한다. Depyrogenation method가 사용된 무엇이든지, validation 자료는 공정이 균체내 독소를 3 logs에 의해 제거 할 것에 관해 설명하여야 한다.

비발열성 process의 적절성을 평가하는 한 방법은 표준화된 균체내 독소를 알려진 양 만큼 가지고 있는 용기들을 사용한 공정을 simulate하는 것과 감소의 정도를 측정하는 것이다. 그러나 FDA는 challenge endotoxins은 어떤 세척 공정들을 평가하기 위해 사용되는 곳의 잠재적인 문제를 알고 있다. 문제는 처음 재용해 하는 물질과 표면에서의 공기 건조 보다는 시험이 행하여 지는 표면에 직접적으로 적용할 수 있는 분말화 된 endotoxin challenge로부터 발생한다는 것이다. 분말화 된 원료들은 재구성된 air-dried material 그리고 용기/closures에 정상적으로 나타나는 균체내 독소보다 세척, 헹구는 물에서 훨씬 더 용해 될 수 있다. 균체내 독소가 존재하고 있는 곳 보다는 균체내 독소를 제거하는데 훨씬 더 효율적이기 때문에, 이것에 관해 고려를 해 보면 공정의 인식을 가져 올 수 있다. 그러므로, endotoxin challenges은 endotoxins이 존재하는 곳보다 목적의 표면들에서의 제거가 쉽지 않을 수도 있다.

관리되지 않은 처리와 저장에 보내지는 플라스틱 용기들은 pyrogen의 출처가 될 수도 있고, 그러므로 플라스틱 용기들은 depyrogenated되어야 한다. 플라스틱 용기들은 ethylene oxide 가스들로 멸균될 수 도 있다. 생물학적인 표시기는 다음과 같은 공정들을 관찰하는데 유용 할 수 있다. 예를 들면 온도, 압력, 습도, 그리고 ethylene oxide 농도의 관찰과 관리를 함께 하는 예를 들 수 있다. Ethylene oxide와 그것의 떨어진 제품들의 경우에는 용기의 위에나 안에 남아 있을 수 있는 잔유물에 대한 잠재성이 평가 되어야 한다.

고무 화합물 정지 장치는 미생물의 그리고 pyrogen 오염의 잠재적인 원인을 제공한다. 고무 화합물 정지 장치는 최종 증기 멸균 전에 여러 번의 멸균과 헹굼의 과정 반복을 통하여 청소된다. 정지 장치의 습기는 미생물적인 성장 및 pyrogen의 생성을 촉진 시킬 수 있으므로, 세척과 멸균사이의 경과시간을 최소화 하는 것은 중요하다. 고무는 열의 불충한 전도체 이고, 고무 정지 장치를 멸균하기 위해서는 공정들의 적절한 validation은 특별히 중요하다.



Ⅵ. TIME LIMITATIONS (시간 제한)
Requirements
Section 211.111(생산에 대한 시간 제한성)은 부분적으로 적절한 때에 의약제품의 품질을 보증하기 위해 부분적으로 생산품의 각 각의 다른 단계의 완성에 관한 시간 제한성의 확립을 요구하게 된다.

Guidance
멸균 의약 제품의 무균 조정에서, 시간 제한성은 여러 조작들에 관해 일반적으로 적절하다. 생산제품 여과 그리고 채우는 작업에 대한 총 시간은, 예를 들어 확립된 최대값에 제한을 하는 것은 미생물 성장이나 여과기를 통과하는 시간에 의해 여과액의 오염을 막기 위해서 이다. 그러한 제한성은 또한 여과기의 상류 부분에 있는 미생물들의 수의 현저한 증가를 막아야 하고, 이 제한성은 pyrogen formation을 하게 하는 것을 증가 시킬 수 있다.

Ⅶ. PRODUCTION AND PROCESS CONTROLS

; VALIDATION (생산과 공정 제어 ; 검증)

Requirements

Section 211.113( 미생물적인 관리) 멸균이라는 하는 의약 제품의 미생물학적인 오염을 막도록 계획된 서류로 작성된 적절한 확립과 준수를 부분적으로 요구한다. 그러한 절차들은 어떤 멸균 공정의 validation을 포함한다.

Guidance
무균공정에 의해 제조된 멸균이라는 칭해지는 제품의 멸균을 보증하기 위해서는 특별히 유효화된 조작의 두 가지 형태, 더 자세히 말하면 무균 조건들 하에서 멸균 그리고 채움/밀폐를 말한다. 만약 제품의 멸균된 요소들 즉 용기 또는 closure이 이러한 요소들을 오염시킨다는 조건에서 같이 결합되면, 가장 효과적인 멸균 공정들의 목적은 무효화 될 수 있다. 거꾸로 제품 성분들이 소독되지 않았을 경우, 성분들이 결합되는 경우를 제외하고 이러한 조건들이 오염을 추가하지 않을 경우에는 제품 멸균은 문제점을 해결 할 수도 있다. 멸균제품 성분들, 이러한 성분들의 멸균의 유효화된 무균 결합의 승인하는 방법에 대한 의문들이 제기 되어 왔다. 그러나, 그전의 조작은 일부 사람들에 의해 가장 어렵다고 인식되고, 더 많은 의문점을 갖게 했다. 그러므로, 제출된 지침서는 유효화된 무균 결합 조작들(예를 들면, 채움/밀폐)에 관해 더 많은 중요성을 두었다.

Aseptic Assembly Operations
유효화된 무균결합 공정의 승인될 수 있는 방법은 멸균 제품을 채우는 조작과 유사한 미생물적인 성장 영양물 매개체의 사용을 포함하는 것이다. Nutrient medium은 조작자들, 장비, 표면들, 그리고 제품들이 겪을 수 있는 것과 같은 노출하는 것을 거의 비슷한 환경적인 조건들에 대해 관리되고, 접하게 된다. 매개물로 채워진 밀봉된 의약 제품 용기들은 그리고 나서 세균배양을 하는 것은 미생물학적인 성장을 막기 위한 것이고, 결과들은 filling/closing하는 조작하는 동안 어떤 주어진 의약제품의 unit가 오염 되는 가능성을 결정하게 된다. 포괄적인 주위의 관찰에 관련하여 media filling은 멸균 용액들, 부유물, 그리고 분말의 무균공정을 유효화 하는데 특별한 가치가 있다. 분말의 유효화된 공정의 일부분으로서, 장비 그리고/또는 filling media는 일상적인 분말 조작들에 관해 수행되지 않는 공정 단계들의 사용을 필요로 할 수도 있다. 그러나 이런 추가적인 노력들은 오염에 대한 분말의 노출을 특징화 하는데 있어서 가치 있고 중요한 것이다.
Media fills에 관해 여러 질문들은 media를 가지고 있는 오염된 장비, 빈번함 그리고 실행 수, 조작의 크기, media 그 자체, 환경적인 조건들, 시험결과에 관해 제기 되어 왔다.

1. Contamination with media – Media fill runs하는 동안 nutrient media로 인한 설비와 장비의 오염의 가능성에 관하여 걱정을 표현해 왔다. 그러나 만약, medium이 적절하게 처리되고, 청소, 위생, 그리고 필요에 따라 장비의 소독에 의해 적절하게 수행되고, 그 다음에 media fill operations은 동일한 설비와 장치를 사용하여 연속적으로 처리된 제품의 품질을 포함하지는 않는다.

2. Frequency and number of runs – 공정이 최초로 유효화 되었을 때, 각 각의 분리된 media fill은 결과들이 연속적이고 의미 있는 것을 확실히 하는 충분한 시간 동안 반복되어 진다. 한번의 조작은 결정이 있을 수도 있기 때문에 이것은 중요하고, 여러 번의 작업들의 폭 넓게 퍼져 있는 결과들은 관리되지 않는 주요한 공정일 수도 있다. 이와 같은 많이 경우, FDA는 적어도 3개의 분리된 작업은 필요하다고 믿고 있다. 이 최소한의 실행 횟수는 산업에서 일반 적인 validation 원칙으로 인식되어 왔다(Refs. 6 and 7). 최초의 validation이 완성된 후 필요에 의한 추가적인 media fills의 빈도수는 events의 수와 멸균된 제품 성분으로 인한 오염을 제외하는 무균공정의 능력에 영향을 미칠 수 있는 변화에 달려 있다. 예를 들면, 설비와 장비의 변경, 직원에 있어서의 중요한 변화, 환경 시험 결과에 있어서의 예외들, 오염된 제품을 나타내는 제품 멸균 시험은 시스템을 재확인 하게 할 수도 있다. 그러한 변화들 또는 결과들이 없는 곳에서, 그러나 일반적으로 승인 될 수 있는 횟수는 각각 이동, 각각의 filling/closing lines에 대하여 매년 마다 적어도 두 번씩 이다. 모든 직원들은 일년에 적어도 한번씩은 media fill에 참가를 해야 한다. Media fill을 사용하는 공정을 확인하는 것에 대한 이유에 달려 있고, revalidation마다 분리된 media fill의 수는 초기의 validation만큼 중요하지는 않다. 예를 들면, 만약 결과들이 초기의 validation과 일치 하는 경우, 그리고 만약 filling 환경의 품질은 확립된 제한성 범위 내에 있다면, 한 번의 작업은 충분 할 수도 있다. 그러나 findings은 불리하고, 지시하는 공정들이 관리되지 않는 상태에 있다면, 추가적인 확인의 media fill 실행은 정당화 될 수 있다.

3. Size of runs – Media fill에 있어서 units의 수는 오염의 낮은 발생률을 발견하는 높은 가능성을 가져 올 수 있도록 충분한 크기이어야 한다. 적어도 3000 units은 95%의 신뢰성을 가지고, 1/1000의 오염비를 발견하기 위해 필요하다( Ref. 4).

무균 공정 조작들의 지속성이나 시간은 또한 조작의 크기를 결정하는데 있어서 중요하게 고려할 사항이다. 특별히 조작의 지속성은 실제적인 공정에 있어서 실제적으로 수행되는 모든 조작들을 처리하는데 충분해야 한다. 시험 units의 수는 실제적인 제조 filling 속도와 동등하거나 느려지는 filling 속도들에서 노출 시간에 대한 가장 최악의 상황을 반영하여야 한다.

안쪽의 반응기 표면과 접촉하고( medium의 용기를 순환 하는 것에 의한) 미생물의 성장의 시각적인 발견을 허용하는 충분한 medium으로 채워지는 각각의 unit은 중요하다.

4. Media - Media의 가장 중요한 측면은 미생물학적인 성장을 촉진시키는 media의 능력이다. 어떤 validation 실행들의 선택 이전에, 미생물학적인 성장을 부양하는 능력이 기술되어야 한다. 이점에 있어서, media fills runs와 함께 확실한 관리 units을 배양하는 것은 중요하다. 일반적으로 soybean-casein digest medium와 같은 호기성 미생물의 넓은 범위의 성장을 부양하는 미생물학적인 성장 medium은 승인 될 수 있다. 멸균 시험 성장 촉진에 대한 United States pharmacopeia/National Formuary—USP XXI/NF XVI에 언급된 미생물들은 이러한 목적에 관하여 승인 될 수 있다.

적당한 media를 선택하는데 있어서, 고려사항은 환경적인 관찰과 양성적인 멸균 시험 결과들에 의해 특별히 확인되는 미생물의 형태들을 성장시키는 그들의 능력이다.

적절한 온도에서 충분한 시간에 관하여 media 샘플을 배양하는 것과 샘플 방법들과 환경적인 조건들에 의한 유기체들에 투여된 가능성의 충격 때문에 다른 배양조건에서 성장하지 않는 유기체들을 발견하는 것은 중요하다.

5. Environmental Conditions – 생산에 관한 품질 제한성들에 의해 확립된 실제적이고 선택되어 지는 유사한 환경적인 조건들 하에서 media fills는 수행되어야 한다. Stressful conditions와 같은 범위에서는 기준 조작 순서들의 범위에서 허용될 수 있고, 이런 절차들에 의해 다루어 지는 공정들을 평가하기 위해 사용된 일부 media fills사이에 stressful conditions와 같은 범위는 존재하는 것은 매우 중요 할 수도 있다. 부정확한 평가는 보통이 아닌 공기 미립자와 미생물적인 품질의 조건 하에서 그리고 생산관리와 media fill에 관한 제법에 있어서 명백히 취해진 예방 조치의 조건 하에서 media fill을 행하는 것으로부터 초래 될 수 있다. 다소, 시스템은 직원, 온도 그리고 습도 같은 것에 대해 확립된 제한성에서 이의가 제기 될 수도 있다.

6. Test results –높은 신뢰 수준을 가지는 시험결과는 무균처리 하는 동안은 오염된 제품 unit의 가능성이 낮다는 것을 보여주어야 한다. 일반적으로, 1/1000의 보다 낮은 경우의 오염 가능성을 나타내는 시험 결과는 승인될 수 있다. 시험결과에서 FDA가 승인할 수 있는 가능성은 무균이라는 칭해지는 무균적으로 처리된 많은 의약 제품이 1000 count 마다 하나의 무균되지 않은 unit을 함유하는 것을 의미하는 것은 아니다. 제조업자는 어느 멸균되지 않은 unit를 선적하는 것에 대한 책임이 있다. FDA는 단지 어떻게 validation에 관해 정밀하게, 정확 하게 하는 것이 오염을 제외한 의도된 관리의 시스템의 특성화 하는 과학적이고 기술적인 제한성이 있다는 것을 인식한다.

Sterilization Operations

Filtration

여과는 멸균 조건 하에서 멸균된 용기들에 이동되는 의약 제품 용액을 멸균하는 것이 일반적인 방법이다. 여과기 표면 cm²당 10⁷ 미생물의 농도를 가지고 있는 멸균 여과기는 멸균 부유물을 생산한다. 그러한 여과기들은 일반적으로 0.22 마이크론이나 그 보다 작은 종류의 것을 가지고 있다. 높은 점도의 성질을 가지고 있는 제품들, 0.22 마이크론 기공을 통과하는 여과를 억제하는 콜로로이드 성질들이 있는 일부 예들에서 연속적으로 0.45마이크론 여과기를 사용함으로써 미생물을 차단하는 것은 가능하다. 그러나 이러한 대안은 나쁘게 작용하는 다른 제품 성질이 없는 여과보다 멸균 확실성의 더 높은 수준을 제공하는 다른 멸균 방법을 사용하는 것은 바람직하다.

여과기 또는 여과기의 결합이 사용된 곳이라면, validation은 가장 나쁜 경우의 생산 조건과 비슷한 미생물적인 challenges, 여과되는 원료들의 미생물의 크기에 관한 것을 포함하고 있어야 한다. 미생물들은 여과기의 평균 크기를challenge하고 생산에서 발생 할 수 있는 가장 작은 미생물과 유사할 정도로 작아야 한다. 미생물 P. diminuta는 이점에 있어서 승인할 수 있는 것은, 적절히 자랐을 경우 수확되고 사용되는 가장 작은 박테리아의 하나로서 0.22마이크론 종류의 큰 기공을 통과할 수 있다. 필터는 통과를 할 수 있는 아주 작은 종류 보다 훨씬 큰 기공들의 수를 포함하기 때문에, challenge에 있어서 미생물들의 수는 중요하다(Ref. 8). 여과되는 원료들에 있는 유기체의 수가 증가함에 따라, 이러한 통행의 가능성은 증가한다(Ref. 9). P. diminuta의 승인할 수 있는 challenge 농도는 적어도 여과 표면의 cm²당 10⁷ 유기물이다. 실직적인 influent bioburden은 목표를 하고 있는 높은 수준의 여과액 멸균 보장을 감소하는 크기 그리고/또는 농도의 미생물을 포함하지 않는 것은 중요하다.

자연적인 멸균 활동을 가지고 있는 생산품 또는 오일을 기본으로 하는 formulations에 P. ediminuta의 추가는 의미있는 filter challenge을 나타내는 것은 아니다. 이러한 경우들에서, challenge fluid는 점도와 미생물적인 challenge에 관하여 상반되는 물리적인 특성에 의해 실질적으로 매우 유사한 제품을 simulate해야 한다.

여과 validation에 대한 challenge 조건들은 다른 생산적인 측면과 influent bioburden을 simulate을 해야 한다. 예를 들면, pH와 여과되는 물질의 점도, 흐름 속도, 압력, 온도, 필터에 관한 원료들의 적합성, 유압의 효과들은 여과공정 validation하는 사이에 여과기의 역할에 영향을 주고, simulate되어야 하는 생각의 요소들이다(Ref . 8). 이런 이런 요소들은 많은 경우는 미생물의 포집의 여과기의 방법에 관한 그들의 효과는 매우 중요하다. 이러한 예는 sieve retention 그리고/또는 흡착을 들 수 있다.

미생물의 challenges를 포함하는 여과 validation 실험들은 실제적인 제조 지역들에서는 수행되지 않아야 한다. 그러나 연구적인 실험들은 이와 같이 논의된 바와 같이 실제적인 생산 조건들을 simulate해야 한다.

대리인은 일부 여과기의 사용자의 능력을 벗어나는 있다는 것을 인식해야 한다. 그러한 경우, 여과기 제조업자 또는 외부적인 실습들에 수행되어진 시험들을 갖는 것은 승인될 수 있다. FDA는 그것을 유효한 실험 자료를 가지고 있는 여과기의 역할이라고 간주한다. 여과기의 수행은 다양한 조건들과 제품들에 관하여 상당히 다르기 때문에, 자료는 사용자의 제품들과 사용의 조건들에 대해 승인할 수 있어야 한다.

의약 제품 집합체들이 비슷한 특성들과 여과기의 효율에 영향을 미치는 처리 조건을 함께하는 곳에서는, 집합체내에서 각각 개인적인 제품에 관한 validation 연구들을 수행하는 것은 필요하지 않다. 다소 관계되는 제품들, 특성을 가지고 있는 validation findings, 그리고 집합체에 대해 가장 challenging은 처리 공정들에 관해 추정하는 것은 승인 될 수 있다. 이러한 추정에 관한 정당성은 서류화 되어야 한다.

여과 공정들이 주어진 생산품들, 공정, 그리고 여과에 관하여 적절하게 유효화된 이후에, 생산 조작에 사용된 동일한 여과기를 교체하는 것과 같은 방법으로 수행된다. 이것을 성취하는 다른 방법은 여과기 integrity 시험자료와 여과기 수행 자료를 서로 관련 시키는 것이다. 일반적으로, 사용하기 이전에 여과기 unit는 모아지고, 멸균 되어진 후, 여과기의 integrity testing은 수행되어야 한다. 그러나 더 중요한 것은, 여과과정 동안 발생 할 수 있는 어떤 여과기 누출 및 관통을 발견하기 위해 사용된다. Forward flow, bubble point, 그리고 pressure hold 시험들은 승인 할 수 있는 integrity 시험들이다.

Equipment

멸균된 의약 제품 또는 멸균된 용기/closure 표면들과 접촉하는 장비 표면들은 물론 멸균 되어야 한다. 이러한 장비 표면에 적용될 수 있는 멸균 공정들을 적절히 유효화 하는 것은 의약 제품 그리고 용기/closures에 관한 그러한 공정들을 유효화 하는 것 만큼 중요하다.

장비에 있어서, filling 장비, 연결선, 그리고 여과기 유지기들은 autoclave에서는 멸균된 증기이고, 다른 형상들은 열분해 형태나 멸균을 수행하는 능력에 영향을 미칠 수 있기 때문에, autoclave에서 loading patterns을 확립하는 것은 중요하다. 유효화된 조건들의 응답을 보장하는 하나의 방법은 공정 기록계의 일부분인 확립된 loading configuration을 따른 것이다.

장비가 있는 곳에서는, 그러한 큰 탱크들이나 움직일 수 없는 파이프는 압력화된 증기의 통로에서 적절히 멸균된다. Validation은 멸균을 달성하기에 불충분한 열이 있는 곳에 잠재적인 cold sports을 확인하기위해 다양한 위치에서 온도와 압력을 고려해야 한다. 예를 들어, piping 시스템에 있는 여과기에는 여과기를 따라 상당한 압력 차이를 일으킬 수 있고, 하류 부분에 있어서 상당한 온도 하강을 일으킨다. 만약 온도에 있어서의 그러한 차이가 멸균에 불리하게 작용한다면, 적절한 하류 장소들에서 적당한 생물학적인 지시계를 두는 절차들은 포함되어야 한다. Validation은 여러 곳에서 온도와 압력의 측정을 또한 포함 해야 한다.

Ⅷ. LABORATORY CONTROLS (실험실 제어)
Requirements
Section 211.160(일반적인 요구들)은 부분적으로 과학적으로 완전하고 적당한 사양들, 기준들, 사양들, 샘플 계획들, 그리고 성분들, 의약 제품 성분들, closures, 고정중인 원료들, 그리고 의약 제품들이 적절히 품질관리 기준을 따르는 것을 확실히 하는 계획된 실험 절차들의 확립을 필요로 한다.

Guidance
무균 공정에 있어서, 가장 중요한 실험실 관리중의 하나는 environmental monitoring program의 확립이다. 샘플들은 혼합실과 조성 제조 지역들에서 성분들이나 제품들 환경에 노출된 지역에서 채취되어야 한다. Filling / closing 하는 동안 조건들이 무균인지 아닌지를 결정하는 것은 무균공정의 미생물적인 품질관리를 관찰하는 것은 매우 중요하다. Room air, 바닥들, 벽들 그리고 장비 표면들을 포함하는 환경의 일상적인 샘플링과 시험은 포함되야 한다. 그러한 프로그램은 장비와 제품 접촉 표면들의 청결과 멸균의 효과를 확립할 수 있어야 하고, 잠재적인 오염물질들이 적당한 수준을 유지하는 것을 결정할 수 있어야 한다. 멸균제가 정상적인 microbial flora에 관하여 그들의 효과를 유지하는 것은 중요하다.

서류화된 monitoring program은 샘플링 위치들과 빈도수를 포함하는 과학적이고 안전한 샘플링 계획을 가지고 있어야 한다. 게다가, 최대 미생물 한계성들은 취해 질수 있는 행동의 명확한 과정과 함께 확립되어야 하고, 그런 결과의 샘플들은 한계성을 초과하는 것으로 발견되었다.

환경의 미생물적인 품질을 관찰하는 승인 될 수 있는 방법들이 있다. 한 가지 방법으로는 환경에 노출된 nutrient bar를 함유하는 settling plates—Petri-type과 같은 passive air samplers의 사용하는 것이다. 이러한 장치들은 agar 표면에 침전되지 않는 미생물들을 발견할 수 없기 때문에, 양적인 monitoring에 있어서 제한된 값을 가지게 된다. 그러나 만약 settling plates가 제품 오염의 가장 큰 위험을 가질 수 있는 중요한 지역들에 위치 하거나, 만약 노출하는 동안 settling plate가 미생물들을 효과적으로 잡을 수 없다면 settling plates은 양적인 지시계로서 가치가 있다. 그러한 샘플로부터 얻은 자료는 공기 샘플들의 다른 형태로부터 얻어진 자료들과 관계가 있다면 유용하다.

공기의 미생물적인 품질을 평가하는 승인 될 수 있는 다른 방법은, agar samplers에 관한 slit, centrifugal samplers, 그리고 liquid implegement와 막 여과와 같은 효과적인 장비를 사용하는 것을 포함하고 있다. 비록 이런 장비들이 샘플 된 공기의 부피 당 유기물의 수를 발견하는 양적인 시험을 허락 하더라도, 각 각의 장비는 어떤 단점을 가지고 있다. 무균지역에서 이런 장비들을 사용하는 것은 필수적이라 인식하고, 이런 장비들은 생산하는 동안 적어도 매일 사용되어야 한다. 많은 생산 이동이 있는 곳에서는, daily monitoring은 각각 이동을 다룰 수 있어야 한다.

Environmental monitoring은 미생물적인 품질에 관해 중요 표면의 시험을 포함하고 있어야 한다. 이런 시험에 대한 사용되는 것들은 touch plates, swabs, contact plates이다. 관리되는 지역에 있어서 다른 표면들은 위생과 멸균 절차의 적절함을 표시 하고, 지원에 의한 오염을 발견하기 위해 정기 적으로 시험되어야 한다.

환경적인 monitoring program은 소생된 미생물들의 정해진 동일성을 포함해야 한다. 동일성은 normal flora와 동일한 오염물 사이에 충분히 구별 짓는 것은 환경의 미생물적인 품질의 합리적인 평가를 허가하기 위해서 이다. 비록 genus와 species에 관해서는 분리의 필요성은 확인되지 않고, 유용한 자료 기반을 확립하는 것과 효과적인 청소와 멸균의 연속성을 설명할 정도는 특성들이 명확할 정도로 충분한 것은 매우 중요하다.

Sterile media fills와 product sterility testing하는 동안 발생하는 유기물들에 관한 잠재적인 관계를 확립하는 분리들을 충분히 특징화 하는 것은 중요하다. 이러한 상관 관계는 sterility 실패를 조사하는데 있어서 매우 가치 있는 것이다.

Environmental monitoring에 사용되는 microbiological culture media은 molds와 yeast와 박테리아를 발견 할 수 있는 능력을 가지고 있어야 하고, microbiological culture media은 시간과 온도의 적절한 조건하에서 배양을 해야 한다.

환경은 공기의 미립자 품질과 게다가 미생물학적인 품질에 관해 관찰 되어야 한다. 중요한 지역들이 많이 이용되는 동안, 중요한 지역들은 적어도 매일 주성분에 관한 미립자들을 관찰해야 한다. 공기들이 작업지역에 유입되면, 입자 발견 장치들은 공기를 샘플 해야 한다.

정기적인 관찰은 정상적인 수준에서 중요한 입자 개수의 변화를 발견하기 위해 실행되어야 한다. 주어진 지역들에서 얻어진 지나치게 높은 미립자들의 수는 조사되어 지고 즉시 수정되어야 하는 비정상적인 상태이다.
Ⅸ. STERILITY TESTING (무균 시험)
Requirements
Section 211.167은 멸균이라 칭해지는 의약 제품의 각각의 배치에 관해서는 sterility를 발견하기 위해서는 적당한 실험적인 시험이 부분적으로 요구된다.

Guidance
Sterility testing의 어떤 측면들은 특별히 중요하다. 이러한 것들은 testing environment의 관리, 시험 제한성들의 이해, 양성적인 결과들의 해석, 그리고 재시험을 부분적으로 필요하다.

Testing environment는 filling/closing 조작들에 관해 사용되는 동등한 설비와 관리를 이용해야 한다. 불충분하거나 빈약한 sterility 시험 설비 또는 관리는 sterility 시험 실패의 높은 비율을 발생 시킬 수 있다. 만약 생산 시설들 및 관리들이 sterility 시험에 관한 이러한 것들 보다 우수하다. 이러한 것들은 사실상 시험된 제품이 no-sterilie되고, 결점 있는 실험실에 관한 양성적인 sterility 시험 결과를 일으키는 특성의 위험이 있는 것을 말한다. 그러므로, 공정에서 일부 부족함 들은 이해 될 수 있다.

일반적으로, sterility tests은 오염의 낮은 수준을 발견하기 위해 그들의 역할은 제한 되어야 한다. 예를 들면, USP XXI/NFXVI에서 기술된 USP sterility test procedure의 샘플 요구 사항은 lot에서 오염의 발견을 가능하게 하는 것의 예이고, units의 10%는 시험중에 십중팔구 오염이 된다(Ref. 5). 제한되는 sensibility는 다음과 같은 사실을 필요로 하게 만든다. Units의 적절한 수의 배치 방출 목적은 시험되어야 하고, 그리고 그러한 것은 배치를 적절히 나타낸다. 게다가, 시험의 제한된 감응도를 고려하는 것, 양성적인 결과들은 전체적으로 평가 되어야 한다.

Positive sterility test result의 평가는 시험에서 관찰된 성장들이 생산오염으로부터 또는 실험적인 error로부터 발생하는 것인지 아닌지에 하는 것에 대한 가능성의 여부의 결정하는 조사를 포함해야 한다. 비록 이러한 결정은 절대적인 확실성을 만족할 수 없지만, 그러한 결정은 한가지 방법이나 다른 방법에 대한 설득력 있는 증거를 얻는 것은 가능하다. 실험적인 실수를 보여주는 설득력 있는 증거가 없을 경우 또는 유효한 증거가 결론에 이르지 못하는 경우 회사들은 안전성 측면에 있어서 잘못을 하는 것이고, 그리고 배치들은 sterility test 요구 사항들을 확신 시키지 못하는 경우에 관해서는 거절되어야 한다.

조사는 제품 제조 및 샘플 시험에 관한 현저한 모든 요소들을 고려해야 한다. 이 점에 관해서는 성장이 일어나지 않는 것이 반복되는 시험들에서 발견 되므로, 단지 실험적 실수에 관한 초기의 positive 결과들을 정하는 것은 부적절 할 수 있다. 다소, 오염의 발단의 증거는 적어도 다음과 같은 사항들에 바탕을 두어야 한다.

1. The deification(by at least genus) of the organism in the sterility test
만약 유기물들이 실험 환경에서 절대로 발견되지 않는다면, 그리고 제품 오염은 더욱 있음 직하다. 만약 유기물이 모든 실험실에 관하여 보통의 것들과 같다면, 생산 환경 제품 오염들은 자동적으로 제외 시키지 말아야 한다.

Sterilization methods에 관한 유기물의 감응도와 제품에 있어서 보존력이 있는 감응도는 오염원의 출처를 결정하는데 또한 유용할 수 있다. 유기물이 sterilization methods 또는 보존력이 있는 것에 대한 저항력이 있을 때, 본질적인 제품오염은 다른 경우들 보다 더욱 고려 되어야 한다. 다른 한편으로는 오염원의 출처, 실험실 실수들에 관해 결여된 적절하지 않는 지시 사항들은 유기물들이 저항하지 않는 곳에서 더욱더 오염의 방법이 될 수도 있다.

2. The laboratory’s record of tests over time
실험실적인 발견들에 있어서의 경향의 조심스런 평가는 오염의 출처에 관해 제외 시키거나 관계 시킬 수 있다. FDA의 경험에서, 연구소가 모든 sterility tests에서 0.5%이하의 초기의 positive sterility 실패들 발견하는 것은 정상적인 것이다. 만약 초기의 positive results가 증가하는 경향을 보이고, 그리고 나서 조사는 초기화 되어야 한다. 초기의 시험들에서 실패 비율이 0.5%보다 높은 것은 실험실적인 또는 생산 문제들을 나타내는 것이고, 그러므로 조사되어야 한다. 전반적인 조사에 있어서 다른 성분들에 관한 상승하는 경향들은 의심 받는 원인이 되는 약품을 확신 할 수 있어야 한다. 이와 비슷하게, false positive의 비율에 있어서, 상승하는 경향들은 조사 되어야 하고, 그러한 증가들은 생산의 조짐 또는 실험적인 문제들일 수도 있다. 더 정확하게 잠재적인 오염을 관찰하기 위해서는 오염원의 원천에 영향을 주는 특성에 따라 구별되는 경향들은 중요하다. 예를 들면, 제품, 용기 형태, filling line, 샘플의 조작 정도에 의한 구별되는 경향을 유지하는 것은 중요하다. 샘플 조작은 최종적으로 멸균된 제품에 관해 같아야 하고, 그리고 무균적으로 처리된 제품, 나중에 초기의 멸균 실패들의 높은 비율은 생산 문제들의 표시에 관한 것으로 받아 들여야 한다.

시간에 걸쳐서 실험적인 환경의 미생물적인 관찰은 유익한 경향을 나타낸다고 할 수 있다. 실험실에서 microbial load에 있어서의 상승하는 경향들은 이유와 수정한 것에 관해 조사되어야 한다. 그러나, 이런 경향들은 sterility test 실패들의 출처에 관해 실험실적인 실수를 더욱더 자세히 나타낼 수도 있다.

3. Monitoring of production area environments
미립자의 중요성은 중요한 지역에 있어서 볼 수 있는 유기물의 경향 분석이다. 상승하는 경향들은 멸균 실패의 출처에 관해 제품을 관련시킨다. Environmental microbial loads의 고려는 로트, 날짜, 또는 의심되는 로트에 관련되는 이동에 관해 생산환경 관찰의 결과들은 제한되지 말아야 한다. 볼수 있는 미생물의 낮은 수준을 보여주는 결과들은 경향의 일부인 더 높은 loads의 발견에 의해 결과들이 일괄적으로 다루어 질 때 특별히 잘못 될 수도 있다. 그러므로, 환경적인 관찰 자료의 넓은 범위를 고려하는 것은 중요하다.

4. Product presterilization bioburden
생산품 bioburden에 있어서의 경항들은 sterility test 실패에 관련된 문제들을 나타낸다. 시험 실패에 관해 동시에 발생할 수 있는 상승하는 upward bioburden 경향들은 제품의 오염에 있어서 더욱 설득적 일 수 있다.

5. Production record view
완전한 배치나 생산 관리 기록들은 제품 멸균을 유지하고 있는 실패들이나 예외를 발견하기 위해 재검토 되어야 한다. 예를 들어, filing lines에 관한 공기 품질 관리의 기록들은 비정상적으로 높은 미립자 수를 나타내는 시간 때를 보여 줄 수도 있다.

6. Sterility test
승인할 수 있는 재시험은 초기에 사용된 것이나 배치 모든 부분의 대표하는 것으로 받아 들여 지는 test units의 수는 적어도 2배의 수집을 포함해야 한다. 재시험에서 성장이 없는 발견물들은 조사의 다른 부분들보다 무게가 덜 나가는 것은 일치 되어야 한다. 그러나, 재시험에서 성장이 관찰되고, 새로운 철저한 조사들이 오염물이 샘플이나 시험하는 절차에서 발생한다는 것을 결과적으로 보여 준다면, 배치들은 퇴짜를 맞아야 한다. 그러한 예들에서 두 번째 재시험은 정당화 되어야 한다. 두 번째 재시험의 샘플 크기는 초기 시험의 두 배 만큼 커야 한다. 만약 성장이 두 번째 시험에서 발견되었다면, 배치는 퇴짜 맞아야 하고, 배치 방출을 목적에 관한 추가적인 재시험이 없는 것은 승인될 수 있다.

Test units의 2배수는 생물학적인 제품들의 첫번째 멸균 재시험에 관한 것은 요구되지 않는다. 만약 두번째 재시험이 정당화 된다면 이것은 필요하다(21 CFR, Section 610.12). 두번째 재시험은 bulk biological material에 관해서는 허가 되지 않는다.